调节柯勒照明是获得最佳图像质量的首要且必需的步骤。其核心目标是提供均匀、明亮且无眩光的照明，并使物镜的分辨率得到充分发挥。以下是标准调节步骤：

第一步：基础准备

1. 开启显微镜电源，将光强调至中等亮度。

2. 放置一个染色适中的样本，使用10倍物镜，常规调焦至图像清晰。

3. 将聚光镜升至最高位置，并将孔径光阑开至最大（约80%）。

第二步：调节视场光阑（关键步骤）

1. 找到并缓慢关小视场光阑（通常位于显微镜底座或聚光镜侧面），直到在视野中看到一个清晰的多边形光斑。

2. 如果这个多边形不在视野中央，使用聚光镜两侧的对中调节螺丝，将其精确调整至视野中心。

3. 缓慢开大视场光阑，直到其边缘刚好消失于视野之外。这一步能最大限度地消除杂散光，提高图像对比度。

第三步：调节聚光镜焦点（实现“柯勒”的关键）

1. 注视视野，缓慢下降聚光镜（使用其专用的升降旋钮）。

2. 在下降过程中，你会看到视场光阑边缘的图像（即那个多边形）从模糊变清晰再变模糊。将其调节到最清晰的状态。此时，光源灯丝恰好被聚焦在样本平面，样本则被聚焦在目镜中，满足了柯勒照明的核心条件。

第四步：调节孔径光阑（控制分辨率与对比度）

1. 取下一个目镜，通过聚焦望远镜或按下伯特兰透镜观察物镜的后焦面（此时会看到一个明亮的光圆）。

2. 调节聚光镜的孔径光阑，使光圆直径调整为物镜后焦面直径的70%-80%。若无专用工具，可在目镜中凭经验调节：调小光圈可增加图像反差但会降低分辨率；通常调节到图像反差刚好令人满意，且无明显衍射伪影为宜。切勿将孔径光阑用作亮度调节工具，亮度应仅由光强旋钮控制。

第五步：最终检查与切换物镜
完成调节后，视野应明亮均匀。当切换不同倍数物镜时，需要：

1. 重新检查并微调聚光镜焦点（因不同物镜的工作距离不同）。

2. 重新调节孔径光阑，以匹配新物镜的数值孔径。

重要提示：一旦为某台显微镜调节好柯勒照明，通常只需在更换物镜或大幅调整后重新进行第二步的后半部和第四步。熟练掌握此流程是进行高质量显微成像的基本功。

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