对厚样本及强散射样本进行深层定量成像一直是一项技术挑战。Evident(原奥林巴斯生命科学事业部)推出的 FLUOVIEW FV5000MPE 多光子激光扫描显微镜,正是为解决这一难题而设计的精密光学系统。它并非简单的设备堆砌,而是集成了新型探测器技术、智能光学矫正与灵活激光配置的综合性成像平台,旨在实现毫米级深度的高清晰度成像。
核心探测技术:SilVIR 探测器的信噪比革命
FV5000MPE 的成像质量基石在于其集成的 SilVIR 探测器。不同于传统的光电倍增管(PMT),SilVIR 系统采用了冷却式硅光电倍增管(SiPM)技术。这一技术路径的改变带来了显著的信噪比(SNR)提升。
在深层成像中,信号光子往往极其微弱且伴随着散射噪声。SilVIR 探测器凭借其高灵敏度和无与伦比的动态范围(1G cps,16位),能够在最少平均处理的情况下捕捉高质量信号。这意味着在同等激发功率下,系统能以更快的速度获取更清晰的图像,有效降低了光毒性风险,同时配合 TruAI 噪声抑制与 TruSight™ 反卷积算法,进一步提升了图像的解析度与对比度。
智能光学系统:TruResolution 与自动校准
为了在厚样本深处保持衍射极限的分辨率,FV5000MPE 引入了多项自动化光学矫正技术:
TruResolution™ 自动校正环物镜:
针对样本折射率不匹配导致的球差问题,该系统配备了专用的 MPE 物镜(如 XLPLN 系列)。这些物镜内置了自动校正环,能够根据成像深度自动补偿球差。无论是使用水浸还是特殊透明化试剂(折射率 1.33–1.52),物镜都能实时调整,确保从表面到深层(最高可达 8mm 工作距离)的图像均保持锐利。
四轴自动激光对准:
多光子成像对光路对准精度要求极高。FV5000MPE 配备了四轴自动激光对准系统,能够实时监测并调整激发光束的位置和角度。即使在不同波长切换或环境温度变化导致光路漂移时,系统也能自动维持最佳激光功率和像素配准,消除了人工校准的繁琐与误差。
深聚焦模式(Deep Focus):
系统具备根据样本散射特性调整激光束直径的功能。对于高度散射的样本,通过收窄激光束,可使更多激发光子穿透至深层,从而在更大深度下获得明亮的高分辨率图像。
灵活的激光配置与多模态扩展
FV5000MPE 基于模块化的 FV5000 平台构建,提供了极高的配置灵活性,以适应不同的实验需求:
激光源选择:系统支持从紧凑型光纤耦合激光系统到高级可调谐红外激光器的广泛配置。用户可以选择单波长固定激光(如 920nm, 1064nm)进行常规成像,也可以配置可调谐激光器(680–1300 nm),实现双波长或三波长同时激发。这种灵活性对于多色荧光标记及二次谐波(SHG)成像至关重要。
多模态成像:该平台支持共聚焦与多光子的无缝切换。用户最多可配置 12 个 SilVIR 探测器通道(6 个用于共聚焦,6 个用于多光子),实现真正的同步多模态采集。
机架多样性:提供正置、倒置及龙门式三种机架选项。特别是龙门式系统,为在物镜下方放置电生理记录设备或其他操作装置留出了充足空间,便于进行复杂的光学操作实验。
FLUOVIEW FV5000MPE 不仅仅是一台显微镜,它是一个高度集成的光子学解决方案。通过 SilVIR 探测器的高量子效率、TruResolution 物镜的像差矫正以及全自动化的光路维护,它成功突破了光学散射的限制,为材料科学、工业检测及复杂结构分析等领域的深层微观观测提供了强有力的技术支撑。
引用:
Evident奥林巴斯显微镜官网首页:https://lifescience.evidentscientific.com.cn/zh/
Evident-奥林巴斯光学显微镜-FV5000:https://lifescience.evidentscientific.com.cn/zh/laser-scanning/fv5000/