聚光镜是显微镜的核心照明部件，作用是将光源光线聚焦到样本平面，提供均匀、充足的照明，直接影响成像分辨率与对比度。奥林巴斯针对不同观察需求设计了多款聚光镜，其使用需遵循 “匹配观察模式 + 精准调节” 原则：

1. 聚光镜的核心类型（奥林巴斯主流型号）

2. 关键参数：数值孔径（NA）

聚光镜的 NA 需与物镜 NA 匹配（理想状态下聚光镜 NA≥物镜 NA），否则会限制物镜的分辨率。例如：

• 低倍物镜（4×，NA 0.10）可搭配阿贝聚光镜（NA 0.90）；
• 高倍油镜（100×，NA 1.40）需使用油浸聚光镜（NA 1.40），并在聚光镜与载玻片间滴加镜油，消除空气界面的光折射。

3. 正确使用步骤

（1）安装与匹配

• 根据观察模式选择对应聚光镜（如相差观察需安装相差聚光镜，并确保相位环与物镜相位环对齐）；
• 调节聚光镜的孔径光阑（Iris Diaphragm）：孔径光阑大小控制照明光束的粗细，通常调节至物镜 NA 的 70%-80%（过大会降低对比度，过小会降低分辨率）。

（2） Köhler 照明调节（奥林巴斯显微镜核心校准步骤）

Köhler 照明可实现均匀照明，最大化分辨率，步骤如下：

1. 放置样本，用低倍物镜聚焦；
2. 关闭孔径光阑，观察视野中的光阑像，调节聚光镜高度（升降旋钮），使光阑像清晰；
3. 打开孔径光阑至与视野边缘齐平（或 70%-80%）；
4. 调节视场光阑（Field Diaphragm），缩小至视野内，调节聚光镜中心调节旋钮，使光阑像居中，再打开视场光阑至视野外；
5. 切换高倍物镜，重复上述步骤校准。

（3）不同观察模式的特殊调节

• 暗场观察：需使用暗场聚光镜，提升聚光镜高度至与载玻片紧密接触（避免漏光），并选用 NA＜聚光镜 NA 的物镜；
• 相差观察：旋转聚光镜的相位环调节旋钮，使相位环与物镜的相位环完全对齐（可通过相位望远镜辅助校准）；
• 荧光观察：聚光镜需退至最低位置（避免激发光反射干扰荧光成像），或使用专用的荧光聚光镜。

4. 常见误区与注意事项

• 误区 1：全程使用最大孔径光阑 —— 会导致对比度下降，尤其是明场观察薄样本时，需适当缩小孔径光阑；
• 误区 2：聚光镜高度固定不变 —— 切换物镜或观察模式后，需重新调节聚光镜高度以保证聚焦；
• 注意事项：避免聚光镜镜头划伤（清洁时用镜头纸蘸无水乙醇）；油浸聚光镜使用后需及时擦除镜油，防止凝固损坏镜片。

总结

奥林巴斯显微镜的观察方法需根据样本特性与研究目标选择，而聚光镜的合理使用是保证成像质量的关键 —— 核心在于 “匹配观察模式 + 精准校准照明”。无论是基础的明场观察还是高端的共聚焦成像，聚光镜的调节都需与物镜、观察模式协同，才能充分发挥奥林巴斯显微镜的性能优势。

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